NIBSC 抑制素 B(WHO國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品)

產(chǎn)品時(shí)間：2022-03-04

簡(jiǎn)要描述：

NIBSC 96/784 抑制素 B(WHO國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品)該制劑含有抑制素 A、抑制素 B 和抑制素 ? 亞基的混合物，在稀釋于含有 Tris (25mM)、氯化鈉 (0.85% w/v)、人血清白蛋白 (0.5% w/v) 和Triton X100 (0.1% v/v) 被冷凍干燥和二次干燥，并在一項(xiàng)國(guó)際合作研究中作為抑制素 B 的候選 WHO 參考試劑進(jìn)行評(píng)估

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世界衛(wèi)生組織參考試劑

抑制素 B，人類(lèi)

NIBSC 96/784

酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎細(xì)胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯DNA大小為100-150kb
二.甲酰胺解聚法：破碎細(xì)胞同上，然后用高濃度甲酰胺解聚蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)合，再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。
三.玻璃棒纏繞法：用鹽酸胍裂解細(xì)胞，將裂解物鋪于乙醇上，然后用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪，DNA沉淀液繞于玻棒。生成DNA約80kb。
四.異丙醇沉淀法：基本同1法，僅用二倍容積異丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在異丙醇中可溶狀態(tài)）
五.表面活性劑快速制備法：用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細(xì)胞，然后用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉淀或透析。
六.加熱法快速制備：加熱96℃-100℃，五分鐘，然后離心后取上清，可用于PCR反應(yīng)。
七.堿變性快速制備：先用NaOH作用20分鐘，再加HCI中和，離心后取上清，含少量DNA。

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