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通常生化試劑盒可分為液體單試劑和液體雙試劑，前者特別適用于半自動(dòng)生化分析儀和小型自動(dòng)生化分析儀，使用方便，缺點(diǎn)是穩(wěn)定性較差。與單試劑相比，雙試劑提高了抗干擾能力，具有穩(wěn)定性能較好，可消除樣品自身空白等特點(diǎn)。此外還有多項(xiàng)同測(cè)組合試劑、濃縮試劑等。對(duì)新的試劑盒，我們首先要查看其資質(zhì)是否齊全，是否為合法有效試劑，是否有相關(guān)的試驗(yàn)驗(yàn)證等。其次，在本實(shí)驗(yàn)室，可做以下工作來(lái)進(jìn)行驗(yàn)證是否適合使用。

一、試劑空白吸光度

用蒸餾水做空白，用zhi 定的空白液加入試劑作為樣品測(cè)試，在測(cè)試主波長(zhǎng)下，記錄測(cè)試啟動(dòng)時(shí)的吸光度(A1)和約5分鐘后的吸光度(A2)，A2測(cè)試結(jié)果即為試劑空白吸光度測(cè)定值，應(yīng)符合企業(yè)給定范圍。這是判定試劑質(zhì)量的一個(gè)有效指標(biāo)。

二、試劑空白變化速率

對(duì)于速率法試劑盒，用zhi 定的空白液加入試劑作為樣品測(cè)試時(shí)，在測(cè)試主波長(zhǎng)下，記錄測(cè)試啟動(dòng)時(shí)的吸光度(A1)和約5分鐘(T)后的吸光度(A2)，計(jì)算試劑空白吸光度變化率(DA/min)，應(yīng)不超過(guò)企業(yè)給定值。測(cè)定試劑空白吸光度變化(ΔA/min)，用來(lái)檢查試劑在工作狀態(tài)下的穩(wěn)定性。但事實(shí)上，試劑空白吸光度變化速率無(wú)法反映試劑盒的穩(wěn)定性，試劑空白吸光度變化速率主要反映干擾程度和儀器的穩(wěn)定性。

三、分析靈敏度

用吸光度差值(ΔA)或吸光度變化(ΔA/min)來(lái)表示單位濃度的被測(cè)物反應(yīng)所引起的信號(hào)變化，其含義類似摩爾消光系數(shù)，應(yīng)符合企業(yè)給定范圍。需要注意的是，分析靈敏度不是越高越好，以適合待測(cè)物檢測(cè)范圍為原則。分析靈敏度一般用于批間比較，較能反映商的配方、原料的一致性。

四、線性范圍

取高濃度樣品和低濃度樣品按不同比例混合成5個(gè)濃度做線性試驗(yàn)。線性范圍內(nèi)的分析性能應(yīng)符合如下要求：

①線性性相關(guān)系數(shù)r應(yīng)≥0.990；

②線性偏差應(yīng)不超過(guò)企業(yè)給定值。試劑(盒)的線性范圍越寬，臨床復(fù)測(cè)幾率越小，但與樣品/試劑比例成反比。

五、重復(fù)性

1. 批內(nèi)重復(fù)性 在重復(fù)性條件下，用高、中、低三個(gè)水平濃度(高、低濃度應(yīng)超過(guò)參考區(qū)間20%～30%，中濃度水平在參考區(qū)間之內(nèi))的控制血清或新鮮人血清測(cè)試試劑，重復(fù)測(cè)試至少10次。

2. 批間重復(fù)性 用質(zhì)量控制血清測(cè)試3×3(3個(gè)批號(hào)，每個(gè)批號(hào)取3瓶)批間差，較能反映商的配方、原料的一致性。干粉或凍干試劑還需測(cè)定批內(nèi)瓶間差，測(cè)定同一批號(hào)的試劑20瓶，用變異系數(shù)(CV)來(lái)表示。變異系數(shù)(CV)不超過(guò)企業(yè)給定值。

六、準(zhǔn)確度

1. 相對(duì)偏差 直接用試劑盒測(cè)定參考物質(zhì)(平行3次)，評(píng)價(jià)測(cè)定均值與靶值的偏離程度。也可用由參考方法定值的高、中、低三個(gè)濃度的人混合血清，用試劑盒平行測(cè)定3次，計(jì)算均值與定值的相對(duì)偏差。

2. 比對(duì)試驗(yàn) 既無(wú)參考物質(zhì)、參考血清，也無(wú)標(biāo)準(zhǔn)品，也可用比對(duì)試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證準(zhǔn)確度。

七、校準(zhǔn)品溯源、質(zhì)控品賦值

1. 校準(zhǔn)品溯源性 根據(jù)GB/T21415及有關(guān)規(guī)定提供校準(zhǔn)品的來(lái)源、賦值過(guò)程及測(cè)量不確定度等內(nèi)容，明確溯源途徑。

2. 質(zhì)控品賦值有效性 質(zhì)控品的測(cè)定結(jié)果應(yīng)在試劑盒規(guī)定的范圍內(nèi)。

八、穩(wěn)定性

1. 效期穩(wěn)定性 取已到效期的試劑盒按以上評(píng)價(jià)方法對(duì)試劑盒性能指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià)。

2. 熱穩(wěn)定性試驗(yàn) 生化試劑盒一般置2-8℃保存，為了快速有效地評(píng)價(jià)試劑盒的穩(wěn)定性，可以用加速試驗(yàn)來(lái)估計(jì)。

3. 開(kāi)瓶穩(wěn)定性 干粉試劑開(kāi)瓶后(復(fù)溶后)在規(guī)定的儲(chǔ)存條件下保存至預(yù)期時(shí)間內(nèi)，產(chǎn)品的性能至少應(yīng)符合線性和準(zhǔn)確度的要求。